DNA-UMSAgen, extracción de DNA genómica para diagnóstico molecular: método rápido y económico / UMSAgen DNA, genomic DNA extraction for molecular diagnosis: rapid and economical method

Introducción. El estudio del ácido desoxirribunocleico (DNA) es imprescindible para la medicina moderna; por ello, se ha diseñado diferentes técnicas para su extracción, cuyos costos son altos y de tiempo prolongado. En este trabajo se describe un método modificado de extracción de DNA (DNA-UMSAgen) basado en la técnica de Miller. Métodos. Las células mononucleares fueron obtenidas de sangre venosa periférica de un sujeto voluntario, para realizar 40 extracciones de DNA; 20 con el método modificado DNA_UMSAgen y otros 20 con el método clásico. Posteriormente se evaluó la concentración, calidad y utilidad de estos DNA extraidos. Resultados. La pureza del DNA extraido por el método DNA-UMSAgen es de 1,88 similar al de la técnica clásica 1,91, las concentraciones obtenidas son 20,4 ug/106 cel y 56ug/106 cel respectivamente. La evaluación por electroforesis en agarosa y la amplificación del exon 12 del gen JAK2 por PCR fue satisfactoria. Conclusión. El método DNA-UMSAgen es una alternativa de extracción de DNA genómico, rápido y económico, adecuado para paises en vias de desarrollo.

INTRODUCTIONDNA is the genetic material of the cell. Actually for its study, laboratory techniques are available that require its extraction free of impurities. This paper describes the DNA-UMSAgen method as an alternative for DNA extraction which is based on the Miller technique.METHODSThe mononuclear cells were obtained of venous peripheral blood of a voluntary subject, for to realize 40 DNA's extractions; 20 with the modified method DNA-UMSAgen and other 20 with the classic method. Later there was evaluated the concentration, quality and utility of these extracted DNA.RESULTSThe DNA purity extracted by the DNA-UMSAgen method is 1,88 similar to the classic technique 1,91, the concentration obtained were 20,4 ug/106 cells and 56ug/106 cells respectively. The evaluation by agarose gel electrophoresis and the amplification of the exon 12 of the JAK2 gen by PCR was successful.CONCLUSIONThe DNA-UMSAgen extraction method is a very acceptable fast, easy and inexpensive alternative method for underdeveloped countries for DNA extraction.

Primera experiencia en aislamiento de celulas endoteliales humans en Bolivia / First experience in the isolation of human endothelian cells in Bolivia

INTRODUCCIÓN: las células endoteliales pueden proveer información valiosa con respecto a muchos procesos patológicos como la aterosclerosis, inflamación, neoplasia y angiogénesis. Este trabajo describe la primera experiencia boliviana en el aislamiento y cultivo de células endoteliales humanas derivadas de la vena umbilical (HUVEC). MÉTODOS: Un segmento largo de cordón umbilical se utilizó para el aislamiento y fue tratado por digestión con colagenasa. Las células endoteliales fueron desprendidas de la íntima y posteriormente cultivadas en medio de cultivo M199 y suero fetal bovino. Técnicas morfológicas, inmunohistoquímicas y de citometría de flujo fueron utilizadas para identificar estas células. RESULTADOS: Se examinaron las células endoteliales obtenidas por análisis morfológico e inmunohistoquímico. El marcaje con CD34 fue positivo para más del 90% de las células obtenidas por digestión con colagenasa analizado por citometría de flujo. CONCLUSIÓN Se logró aislar y cultivar HUVEC de manera exitosa. Una gran variedad de experimentos y aplicaciones en ciencias biomédicas pueden ser potencialmente factibles.

INTRODUCTION: endothelial cell study yields valuable information concerning many pathologic processes such as atherosclerosis, inflammation, neoplasia and angiogenesis. This paper describes the first Bolivian experience in isolation and culture of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). METHODS: a long segment of the umbilical cord was processed by collagenase digestion. Endothelial cells were detached from intima and further cultured using M199 culture media. Morphologic, immunochemistry and flow cytometry approaches were used to identify these cells. RESULTS: morphologic and immunochemistry analysis of the pool of obtained cells were positive for HUVEC. CD34 staining was positive in more than 90% of the cells obtained by collagenase digestion as assessed by flow cytometry. CONCLUSION: HUVEC were successfully isolated for the first time in Bolivia. A great deal of further experiments and applications in biomedical sciences is possible

Aneurisma de Rasmussen: informe de un caso y revisión de la literatura / Rasmussen aneurysm: a case report and review of the literature

Un paciente del sexo masculino de 73 años de edad con tuberculosis pulmonar de 7 años de evolución se presentó por hemoptisis. La angiografía bronquial mostró una lesión hipervascular de 6 x 7 cm de tamaño con múltiples fístulas arterivenosas. Los intentos de embolización no pudieron resolver el problema debido al alto riesgo de la lesión, razón por la cual se decidió no operarlo. El paciente fue dado de alta con tratamiento medicamentoso para tuberculosis. Los aneurismas pulmonares producidos por erosión arterial en las cavitaciones tuberculosas son raros. Fueron descritos detalladamente por Fearn, Laenned y Rasmussen en el siglo pasado. Es importante su diagnóstico debido a que la histoia natural de la gran mayoría de estos aneurismas es la ruptura mortal